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              制片技術

              干涸組織的補救辦法

              由于機器故障等各種原因導致組織在脫水過程中長時間暴露在空氣中,引起組織干涸發硬。解決方法:組織干涸導致組織

              內水分減少時一般采取95%乙醇和無水乙醇短時間處理(各半小時),防止組織進一步硬化,然后用二甲苯透明,常規浸蠟(可適

              當延長透明、浸蠟時間)。也可以用30%丙三醇水溶液里浸泡幾小時后洗干凈再脫水、透明、浸蠟。組織干涸后最大的問題是細胞

              核無法上色,這在組織處理不佳時也同樣存在,導致切片無法診斷。筆者通過長期的實踐,發現用EDTA 或EGTA 溶液煮沸20 分鐘

              (高壓鍋隔水加熱,帶帽出氣后3 分鐘)可以解決部分問題。也可將組織切片脫蠟至水后放入丙酮內處理5-10分鐘(或60℃5-6分

              鐘)。對于由于組織脫水不佳、組織干涸引起細胞核不能著色,用1%二氯化鈷染色法可能會有所改善。

              Dingwei's 1%二氯化鈷染色法:

              (1)切片脫蠟至水后,在1%二氯化鈷溶液內浸泡過夜(高壓鍋內隔水加熱,帶帽出氣后3 分鐘也可以達到同樣的效果,但氯化鈷

              氣體可能有一定的毒性,如非十分緊急,不要使用)。

              (2)水洗。

              (3)蘇木素染色5-10分鐘,水洗。

              (4)1%鹽酸乙醇分化。

              (5)水洗。

              (6)流水藍化。

              (7)伊紅染色(經1%二氯化鈷溶液處理后,胞漿略有蘇木精非特異性著色,伊紅不容易著色,故染色時間要延長)。

              (8)梯度乙醇脫水、二甲苯透明、中性樹膠封固。

              結果:無法著色的細胞核顏色加深。但是,此染色僅僅是核染色的加深,已經變性的細胞膜、染色質顆粒均無法復原。

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              時  間:2020-09-27 17:53

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